【摘 要】
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为建立一种快速、灵敏、特异的金黄色葡萄球菌A型肠毒素(staphylococcal enterotoxin A,SEA)检测方法,本研究以原核表达的可溶性重组SEA蛋白为免疫原,获得了特异性强、亲和力高的单克隆抗体作为捕获抗体,同时制备抗SEA兔多抗血清作为检测抗体建立双抗体夹心ELISA (double antibody sandwich ELISA,DAS-ELISA)检测方法.结果表明:该方
【机 构】
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浙江大学动物科学学院浙江省动物预防医学重点实验室,浙江杭州310058
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会第十三次学术交流会
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为建立一种快速、灵敏、特异的金黄色葡萄球菌A型肠毒素(staphylococcal enterotoxin A,SEA)检测方法,本研究以原核表达的可溶性重组SEA蛋白为免疫原,获得了特异性强、亲和力高的单克隆抗体作为捕获抗体,同时制备抗SEA兔多抗血清作为检测抗体建立双抗体夹心ELISA (double antibody sandwich ELISA,DAS-ELISA)检测方法.结果表明:该方法对SEA的线性检测区间为2-128ng/mL(y=1.102x-0.07,R2=0.994),检测下限为1.89ng/mL,与SEB、SEC2和SED之间无交叉反应;鲜奶SEA人工污染试验测定回收率为85％-120％,变异系数小于10％.应用该方法对46株金黄色葡萄球菌水产品分离株体外培养上清进行检测,阳性率为4.4％,表明水产品分离株中SEA阳性菌的污染率较低.本研究成功建立的DAS-ELISA方法特异性、灵敏度和稳定性好,为检测SEA的食源性污染提供了有效手段.
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