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目的 :自噬(autophagy)是细胞内广泛存在的一种非常保守的细胞降解过程,使细胞应对内外环境条件的改变而处于一个最适合的生存状态,具有重要的生理作用。迄今,对自噬与细胞生存两者之间的关系还没有一个非常清晰与明确的说法,比较公认的说法是细胞生存和自噬的强度,自噬细胞的类型与状态都有着非常密切的关系。我们实验室新筛选出来的一种溶酶体跨膜分子TMEM74已经确定是一种自噬诱导蛋白,在饥饿诱导的自噬过程中发挥着一个非常重要的作用。因此本实验主要探讨TMEM74对于细胞功能性结局的影响,阐明TMEM74诱导细胞发生自噬的机制和导致细胞发生相应功能性结局的机制。方法 :在Hela与U2OS细胞中,过表达TMEM74,观察细胞的生存状况与应答营养匮乏等环境的情况;过表达TMEM74,探究细胞内细胞通路的变化,同时通过Confocal与Co-IP来探究其与ATG分子之间的联系。结果 :过表达TMEM74对肿瘤细胞的增殖有一定程度的促进作用,在营养匮乏,诱导肿瘤细胞凋亡的因素等环境于情况下,细胞发生了一个明显的抵抗性的改变;在过表达TMEM74的肿瘤细胞中,PI3K/AKT通路有非常明显的激活效应;实验证明,TMEM74与ATG5,ATG16,ATG9,LC3,STX17等参与噬泡形成过程中下游的分子有着非常明显的共定位,Co-IP实验进一步验证了其与ATG5-ATG12-ATG16复合物可能存在着物理上的相互作用,过表达TMEM74,ATG5-ATG12复合体也有一个非常明显的上调。结论 :TMEM74对细胞生存具有积极的影响,其引起的自噬可以以激活肿瘤细胞内部某些信号通路的方式来发挥其作用;TMEM74诱导细胞发生自噬的机制可能与ATG5-ATG12-ATG16复合物的形成以及最终自噬泡的形成有着千丝万缕的联系。