IL-12通过Akt通路诱导乳腺癌细胞自噬

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目的:探讨重组人IL-12对乳腺癌细胞自噬的影响。方法:用一定浓度的重组人IL-12(rIL-12)分别作用乳腺癌MDA-MB-231和MCF7细胞不同时间,或者用不同浓度的rIL-12对乳腺癌细胞作用一定时间,用免疫蛋白印迹技术检测白噬微管相关蛋白轻链3(LC3)的变化,用免疫荧光技术检测在乳腺癌细胞中LC3以观察自噬情况;用透射电镜观察rIL-12处理乳腺癌细胞前后自噬小体的变化。通过Akt通路激活剂IGF-1激活PI3K-Akt通路,检测p-Akt、Akt蛋白表达以及自噬标志蛋白LC3的变化。结果:两株乳腺癌细胞经rIL-12处理后检测其自噬标志蛋白LC3结果显示,与未处理组相比,rIL-12处理组细胞的自噬标志蛋白表达明显增高, LC3Ⅱ/β-actin的值同样明显增大,且增加程度呈时间和浓度依赖性;使用免疫荧光观察自噬体形成的结果显示,与未处理组相比,rIL-12处理组的细胞核周点状聚集的绿色荧光明显增多;使用电镜观察到rIL-12处理组明显有自噬小体形成。使用IGF-1激活PI3K-Akt通路后,IGF-1+rIL-12组与rIL-12相比,LC3表达减少。结论:IL-12可能通过抑制PI3K/Akt通路作用于mTOR,从而激活乳腺癌细胞自噬,并促进自噬标志蛋白LC3 Ⅱ的表达。
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