【摘 要】
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目的 蛋白磷酸酶2A 的调节亚基B(Protein Phosphatase 2 Regulatory Subunit Balpha,PPP2R3A)作为PP2A 的一个调节亚基,既能参与PP2A 的活性调节,还参与了肿瘤相关的信号蛋白的调节.本研究过表达蛋白PPP2R3A 对肝癌细胞增殖与侵袭能力的影响.方法 通过免疫组织化学法分析癌组织及癌周组织中PPP2R3A 表达,利用慢病毒载体构建稳定过表
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目的 蛋白磷酸酶2A 的调节亚基B(Protein Phosphatase 2 Regulatory Subunit Balpha,PPP2R3A)作为PP2A 的一个调节亚基,既能参与PP2A 的活性调节,还参与了肿瘤相关的信号蛋白的调节.本研究过表达蛋白PPP2R3A 对肝癌细胞增殖与侵袭能力的影响.方法 通过免疫组织化学法分析癌组织及癌周组织中PPP2R3A 表达,利用慢病毒载体构建稳定过表达PPP2R3A 的肝癌细胞系(Huh-7 和HepG2),通过CCK-8、流式细胞仪、transwell 小室实验(Transwell chamber)分别检测稳转肝癌细胞系增殖、周期、凋亡以及侵袭转移的生物学行为的改变,并构建裸鼠皮下瘤模型验证肝癌细胞生长情况.结果 癌组织中PPP2R3A 的表达高于癌旁；过表达PPP2R3A 后,肝癌细胞的吸光密度值增加(optical density,OD)(P＜0.05),细胞周期 G1 期向S 期转换增多(p＜0.05),早期凋亡率减少(p＜0.01)；迁移到下室的Huh-7 细胞数目增多(P=0.033),铺上基质胶后到达下室的细胞数目同样增多(P=0.047)；裸鼠的皮下瘤生长增加(P=0.0035).western blot 实验显示剪切体的PARP和P53 蛋白表达减少,而β-catenin 蛋白在肝癌细胞的积累增多.结论 过表达PPP2R3A 基因可能促进肝癌细胞的增殖、迁移与侵袭能力,抑制凋亡,诱导G1/S 期转换,参与影响肝癌细胞生物学行为.
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