小分子糖类物质在血小板冰冻干燥保存中的生物保护作用的初步研究

来源 :第五届全国低温生物医学及器械学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jizhe621
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冰冻干燥法保存的血小板具有室温下性能稳定,可货价保存;体积小,重量轻(小于原重量的10%);易于长期储藏;运输方便;临床应用快捷,容易再水化(复水)及便于病原体消毒处理等优点,所以冻干保存法有可能成为最理想的血小板保存方法.但冰冻干燥过程对血小板的结构和功能损伤很大,所以冻干保护剂的选择和使用是血小板冻干保存的关键.据文献报道,一些小分子糖类物质主要有海藻糖、麦芽糖、蔗糖、葡萄糖等,尤其是海藻糖在冻结、干燥、高渗透压等这类严酷的环境下,对生物膜、膜蛋白、DNA等发挥着保护功效.因此笔者将以上有防冻和抗干燥作用的小分子糖类物质负载到细胞内,着重研究海藻糖、蔗糖和葡萄糖在冰冻干燥中对血小板的保护作用.研究结果表明单独使用海藻糖负载虽可提高血小板对渗透压的耐受性,但研究发现海藻糖负载保护对血小板的聚集活性损伤很大,海藻糖负载后样本的最大聚集率为2%±0.5%~36%±6.3%;葡萄糖对细胞膜有良好的保护作用,将一定浓度的葡萄糖与海藻糖同时导入细胞内,可以在一定程度缓解单海藻糖负载后对血小板聚集活性的破坏,联合使用葡萄糖和海藻糖负载后其聚集活性有所提高,10分钟内最大聚集率为19%±3.6%~46%±10%,联合使用海藻糖、蔗糖、葡萄糖负载作为血小板冻干保护剂,既可以保护血小板的膜结构完整又能保证负载以上三糖后血小板的聚集活性,10分钟内最大聚集率平均在60%以上.以上实验结果说明,可在温和条件下,将抗冻剂和抗干燥剂导入到血小板细胞内,保持血小板形态完整(光学显微镜下观察)和较高的聚集活性,这为下一步冰冻干燥保存血小板实验奠定了良好的基础.
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