基于JAK/STAT的栀子苷体外抑制巨噬细胞M2极化作用

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目的:研究栀子苷对巨噬细胞M2极化的影响,并探讨其可能机制.方法:以巨噬细胞系RAW264.7为研究对象,以不同浓度的栀子苷(0~25 μmol·L-1)预孵后加白细胞介素4(IL-4)/细胞介素13(IL-13)(20 ng·ml-1)刺激并培养至相应时间点,MTT法检测栀子苷对巨噬细胞的活力,蛋白质印迹法(Western Blot)测定巨噬细胞M2极化标记精氨酸酶1(ARG1)、类几丁质酶3样分子(YM1)以及Janus激酶1(JAK1)/信号转导和转录激活因子6(STAT6)信号通路(p-STAT6、STAT6和p-JAK1)的蛋白表达.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定巨噬细胞M2极化标记ARG1、炎症区域1(FIZZ1)、YM1、甘露糖受体C1(MRC1)、干扰素调节因子4(IRF4)和巨噬细胞半乳糖-C型凝集素-2(MGL-2)的基因表达.结果:与未用IL-4或IL-13处理相比,L-4或IL-13处理组典型M2标记物ARG1、FIZZ1、YM1、MRC1、IRF-4和MGL-2基因表达升高,ARG1和YM1的蛋白水平升高;相反,与IL-4或IL-13处理组相比,栀子苷预处理显著抑制上述标记物的基因表达,抑制ARG1和YM1的蛋白水平,且呈剂量依赖性(P<0.05或P<0.01).此外,IL-4处理诱导巨噬细胞JAK-STAT活化,与仅IL-4处理组相比,栀子苷预处理显著抑制巨噬细胞JAK-STAT活化(P<0.05或P<0.01).结论:栀子苷可能通过抑制JAK-STAT抑制小巨噬细胞M2极化.
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