维生素D结合蛋白在结肠癌中的表达及其对细胞增殖、迁移及凋亡的影响

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目的 GC蛋白在大部分恶性肿瘤中呈高表达,且对肿瘤的形成、发生及发展起着重要的作用,然而GC蛋白对结肠癌的形成进展影响并不清楚,本文探讨结肠癌中的GC蛋白表达及其对细胞生物学行为的影响。方法应用RT-PCR检测结肠癌细胞中GC蛋白的表达情况,选取GC蛋白表达量最高的SW1116细胞株为研究对象,分为干扰组(GC-siRNA组),阴性对照组(Negative control siRNA组),空白对照组(Blank组),运用siRNA干扰技术,沉默SW1116中GC蛋白的表达,分别对各组细胞运用MTT法检测细胞增殖的情况,运用Transwell试验检测细胞迁移能力的变化,运用Annexin.V.PI双染法流式细胞术检测细胞的凋亡状况,观察沉默GC基因对SW1116细胞生物特性的影响。结果 GC在大肠癌细胞中呈高表达,显著高于正常结肠细胞株CCD18Co,差异有统计学意义(SW480 vs.CCD18Co,P=0.003;SW620 vs.CCD18Co,P<0.01;SW116 vs.CCD18Co,P<0.01),其中SW1116细胞表达最高(RQ值4.3±3.5);沉默SW1116细胞GC基因后,相比两对照组,GC-siRNA组细胞活性率在转染后48 h和72 h显著下降,差异有统计学意义(24 h,P=0.034;48 h,P=0.009);Transwell实验结果显示GC-siRNA组迁移过纤维膜细胞数为(51.6±9.4)个,阴性对照组(182.1±16.1)个,空白对照组(174.3±22.8)个,迁移能力减低(P<0.01);Annexin V-FITC细胞凋亡实验结果显示干扰组凋亡率为(28.5±5.9)%,明显高于阴性对照组(5.6±2.1)%和空白对照组(6.1±2.3)%,细胞诱导凋亡增加(P<0.01);两对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论沉默结肠癌细胞中的GC蛋白表达后,细胞的增殖减慢,迁移能力减低,凋亡诱导增加,GC基因可能与结肠癌的发生与进展相关,或可作为结肠癌基因治疗的靶点。
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