大鼠HSP27基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定

来源 :中国药理学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ReganCai
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目的构建大鼠的热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)RNA干扰慢病毒载体。方法设计并合成3对互补针对大鼠HSP27 mRNA的oligoDNA片段。磷酸化和退火后,分别克隆入pSUPER—basic质粒载体,获重组的pSU—PER—HSP27-oligoDNA。将其中表达shRNA的结构酶切插入慢病毒转移质粒pNL—IRES2一EGFP,产生pNL—HSP27-IRES2-EGFP,在293T细胞中与VSVG、pHelper包装产生慢病毒。48h后收集上清液,离心过滤后进
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