【摘 要】
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目的 研究syndecan-4对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导人肾小球系膜细胞(HMC)增殖及细胞外基质(ECM)分泌的影响,并探讨syndecan-4-蛋白激酶Cα(PKCα)途径在其中的作用.方法 免疫荧光方法 观察syndecan-4在HMC上的表达.筛选有效的syndecan-4-siRNA转染HMC,噻唑蓝(MTY)比色法检测HMC在bFGF不同作用时间下的增殖差异;ELISA法
【机 构】
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325027,温州医学院附属育英儿童医院肾内科,325027,温州医学院附属育英儿童医院肾内科,325027,温州医学院附属育英儿童医院肾内科,上海长征医院肾内科解放军肾脏病研究所,上海长征医院肾内科
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目的 研究syndecan-4对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导人肾小球系膜细胞(HMC)增殖及细胞外基质(ECM)分泌的影响,并探讨syndecan-4-蛋白激酶Cα(PKCα)途径在其中的作用.方法 免疫荧光方法 观察syndecan-4在HMC上的表达.筛选有效的syndecan-4-siRNA转染HMC,噻唑蓝(MTY)比色法检测HMC在bFGF不同作用时间下的增殖差异;ELISA法检测细胞上清液中的Ⅰ、Ⅳ型胶原和纤连蛋白(FN)含量;荧光定量PCR观察syndecan-4和PKCα含量的变化.结果 syndecan-4蛋白在HMC有表达.bFGF可促进HMC的增殖及FN、Ⅳ型胶原的分泌,使得每百万看家基因中PKCα拷贝数明显增加.转染syndecan-4-siRNA后,显著降低了HMC的增殖速度(48～60 h时点,P<0.01)、ECM分泌(FN:24 h时点,P<0.01,48～96 h,P<0.05;Ⅳ型胶原:72～96 h时点,P<0.05)及PKCα含量(0 h时点,P<0.05,12～48 h时点,P<0.01).结论 syndecan-4参与调控bFGF诱导HMC的增殖及ECM分泌过程.syndecan-4-PKCα途径可能在其中扮演重要作用。
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