探讨腺苷对人毛囊生长的促进作用及对血管生成素表达的影响。
方法分离完整的人头皮生长期毛囊,分成6组,分别加入0、0.1、1、10、100、1 000 μmol/L腺苷作用,每个浓度组再分成两个亚组,其中一个亚组加入0.8 mg/L抗人血管生成素抗体,另外一个亚组不加抗体,显微镜下测量6 d内毛囊的生长长度。利用两步酶法分离培养人毛乳头细胞,分组同上,作用48 h后,噻唑蓝法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,逆转录(RT)-PCR和ELISA分别检测人毛乳头细胞血管生成素mRNA和细胞上清液中血管生成素蛋白的表达。
结果与不加腺苷的对照组相比,10~ 1 000 μmol/L腺苷能够明显促进体外培养的人毛囊生长(F= 377.776,P < 0.05),其中以100 μmol/L腺苷的促进作用最为显著(P < 0.05),加入抗人血管生成素抗体能够部分拮抗腺苷促进人毛囊生长的作用。与对照组相比,0.1~ 1 000 μmol/L腺苷能够明显促进体外培养的人毛乳头细胞增殖(F = 230.067,P < 0.05),其中以10 μmol/L和100 μmol/L腺苷促进细胞增殖的作用最为显著(均P < 0.05),加入抗人血管生成素抗体能够部分拮抗腺苷促进细胞增殖的作用。流式细胞仪检测显示,与对照组相比,10~ 1 000 μmol/L腺苷能够显著下调毛乳头细胞G1期细胞比例(F= 75.5,P < 0.05),并显著上调G2期(F= 15.7,P < 0.05)和S期(F= 81.8,P < 0.05)细胞比例。而且,与对照组相比,10 μmol/L和100 μmol/L腺苷能够明显促进毛乳头细胞表达血管生成素mRNA(F= 942.630,P < 0.05)和血管生成素蛋白(F= 148.544,P < 0.05)。
结论腺苷在体外具有促进人毛囊生长和毛乳头细胞增殖的作用,其机制可能与上调血管生成素表达有关。