目的 通过研究蛋白激酶Cα(PKCα)参与调控肿瘤坏死因子α(TNFα)增强肾小球系膜细胞Ⅰ型1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP3RI)表达的信号机制,揭示TNFα引起肝肾综合征肾小球滤过率(GFR)下降的分子机制.方法 选择大鼠系膜细胞株(GMCs)进行体外培养.按TNFα处理GMCs的不同时间点,分为对照组(D)、TNFα-2 h组、TNFα-4 h组、NFα-8 h组、TNFα-24 h组,另设2组分别为Sanfingol-8 h组(S)、TNFα+ Sanfingol共培养8h组(TS),共6组.应用免疫细胞化学染色、Western blot、Real time-PCR检测方法,观察TNFα孵育的GMCs中IP3RI表达的变化.结果 免疫细胞化学染色发现:IP3RI主要分布于GMCs的胞浆内,对照组阳性信号较弱,TNFα处理各组棕褐色阳性信号增强,以TNFα-8 h组最明显.Western blot分析发现:TNFα-4 h组、TNFα-8 h组、TNFα-24 h组与对照组差异有统计学意义(4 h:1.82±0.63,8 h:2.95±0.66,24 h:2.48±0.72,D:1±0.02,F=9.24,P＜0.05).其中TNFα-8 h组、TNFα-24 h组IP3RI表达最高(P＜0.05).S组、TS组与对照组差异无统计学意义(S:1.39 ±0.65,TS:1.35±0.37,P＞0.05).Real time-PCR发现:TNFα处理各时间点组与对照组相比IP3 RI表达均明显增加,差异有统计学意义(2 h:3.35±1.97;4 h:3.16±1.35,8 h:3.70±1.76;24 h:4.49±1.70,D:1±0.01,F=6.167,P＜0.05). TNFα各处理组组间差异无统计学意义(P＞0.05).S组、TS组与对照组比较差异无统计学意义(S:1.53±0.79,TS:1.32±0.38,P＞0.05).结论 IP3 RI主要分布于GMCs的胞浆内,TNFα可增加肾小球系膜细胞IP3 RI蛋白、mRNA的表达,并可被PKCα抑制剂Sanfingol所阻断,这可能是肝肾综合征时TNFα引起GFR下降的重要信号机制。
TNFα增强肾小球系膜细胞Ⅰ型1,4,5-三磷酸肌醇受体表达受PKCα调控
【摘 要】
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目的 通过研究蛋白激酶Cα(PKCα)参与调控肿瘤坏死因子α(TNFα)增强肾小球系膜细胞Ⅰ型1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP3RI)表达的信号机制,揭示TNFα引起肝肾综合征肾小球滤过率(GFR)下降的分子机制.方法 选择大鼠系膜细胞株(GMCs)进行体外培养.按TNFα处理GMCs的不同时间点,分为对照组(D)、TNFα-2 h组、TNFα-4 h组、NFα-8 h组、TNFα-24 h组,另
【机 构】
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110001沈阳,中国医科大学附属第一医院传染科,中国刑事警察学院卫生所,110001沈阳,中国医科大学附属第一医院传染科
【出 处】
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中国医师杂志
【发表日期】
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2013年15期
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