野生型p16基因体外诱导人瘢痕疙瘩成纤维细胞衰老的研究

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目的观察野生型p16基因对人瘢痕疙瘩成纤维细胞的生物学效应,探讨对瘢痕疙瘩进行基因治疗的可行性. 方法通过基因转染将含p16 cDNA 的真核表达载体pcDNA3-p16 导入人瘢痕疙瘩成纤维细胞中,筛选出阳性克隆后用测定细胞生长曲线、细胞周期及细胞超微结构等方法观察细胞的变化,用衰老相关-β-半乳糖苷酶染色法鉴定细胞形态. 结果细胞在转染野生型p16基因后自第3代起形态发生明显变化,细胞增殖明显减慢,细胞周期分析显示有96.7%的细胞处于G1期;电镜分析表明,细胞出现明显的溶酶体超载现象.衰老相关-β-半乳糖苷酶染色证实细胞进入衰老期. 结论野生型p16基因可诱导人瘢痕疙瘩成纤维细胞提前进入衰老阶段,这为瘢痕疙瘩基因治疗提供了实验依据.

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