弓形虫抗体免疫印迹试剂盒的研制

来源 :中国寄生虫学与寄生虫病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lastdemon
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目的研制敏感、特异的检测弓形虫IgM和IgG抗体免疫印迹试剂盒.方法收集人工感染RH株弓形虫速殖子昆明系小鼠的腹腔液,提取弓形虫胞质蛋白,采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离弓形虫可溶性抗原,并经电泳转印至硝酸纤维膜,以无毒灵敏的四甲基联苯胺(TMB)为底物分别检测30份弓形虫IgM和28份IgG阳性血清,40份健康人血清.通过比较抗原制备方法和使用剂量、封闭剂、洗涤和稀释剂、工作浓度、作用时间以及反应带出现率,选择最佳实验条件,以敏感性、特异性、Youden指数以及稳定性作为试
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