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目的
分析原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMC)中长链非编码RNA(lncRNA)表达谱，为PBC的发病机制、临床诊断和治疗提供新的方向。
方法收集PBC及健康对照组外周抗凝血各30份，分离PBMC，从中各选取4份进行lncRNA表达谱芯片测定，并用逆转录PCR(RT－PCR)验证芯片结果。对芯片结果进行生物信息学分析，如Cis/Trans靶基因分析、Gene ontology(GO)分析、Pathway分析和共表达网络预测，并设计小干扰RNA(siRNA)干扰lncRNA的表达，进行靶点验证。
结果相对于健康对照组，PBC患者PBMC中共发现749个异常表达的lncRNA，230个异常表达的信使RNA(mRNA)。PBC组核受体(NR4A3)基因表达水平下调78%，而在NR4A3基因下游20 000 bp左右的lncRNA linc－pbc的表达上调2.56倍。转染针对linc－pbc的siRNA后，PBMC中linc－pbc的水平下降，而NR4A3的mRNA表达水平及蛋白质水平均上调，叉头状转录因子(FOXP3)的表达也上调。
结论linc－pbc或许通过招募多梳蛋白抑制性复合物(PRC2)，使NR4A3基因启动子区甲基化，下调NR4A3基因的表达水平，使其调控靶基因转录的活性降低，导致下游的靶基因FOXP3的表达下降，进而引起外周血及肝组织局部具有免疫抑制功能的调节性T细胞(Treg)细胞数量减少，打破机体免疫耐受平衡，促进PBC的发生和发展。(中华检验医学杂志，2018, 41：374－379)