三七皂苷对TGF-β1诱导的大鼠肾小管上皮细胞EMT的影响

来源 :中国实验方剂学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jskrrockboy
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目的:研究三七皂苷(PNS)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠肾小管细胞上皮–间充质转化(EMT)的干预作用,并从沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)/TGF-β1/Smad通路分析其可能机制。方法:在DMEM培养基中,用10%胎牛血清培养大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E),分为正常组,TGF-β1组(5μg·L-1),白藜芦醇组(50 mg·L-1),SIRT1阻断剂EX527组(10μmol·L-1),PNS组(100 mg·L-1),EX527+PNS组(EX527 10μmol·L-1,PNS 100 mg·L-1),48 h后收集细胞;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测SIRT1,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),钙粘附蛋白E(E-cadherin),TGF-β1,Smad3,Smad4的m RNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测SIRT1,α-SMA,E-cadherin,TGF-β1的蛋白表达。结果:与正常组比较,TGF-β1组α-SMA mRNA及蛋白表达明显增多(P<0.05),E-cadherin表达显著减少(P<0.01)。与TGF-β1组比较,PNS,白藜芦醇组,E-cadherin mRNA及蛋白表达均显著增加(P<0.01),α-SMA表达显著减少(P<0.01),EMT发生被抑制。同时,SIRT1表达显著增加(P<0.01),TGF-β1,Smad3,Smad4表达显著降低(P<0.01)。在SIRT1阻断剂EX527的干预下,PNS则不能发挥明显抑制作用。结论:PNS可以阻止TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞EMT的发生,其机制可能是通过激活SIRT1进而抑制TGF-β1/Smad通路实现的。
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