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目的
在成骨不全症(OI)患者中鉴定Ⅰ型胶原基因(COL1A1和COL1A2)致病突变，构建中国人OI致病基因突变谱，并在此基础上完成OI高危胎儿的产前基因诊断。
方法应用酚/氯仿法提取先证者及家系成员外周血基因组DNA，联合应用聚合酶链反应(PCR)- Sanger DNA测序和靶向高通量测序技术对200例OI先证者进行COL1A1/2编码区及外显子/内含子衔接区的DNA序列分析；采用PCR-高分辨熔解曲线(HRM)技术对先证者及其家系成员进行突变验证；通过PCR-测序对散发病例的父母样本进行突变检测，进而确定突变来源；联合应用PCR-测序和微卫星标记等位基因分析的方法进行胎儿产前基因诊断。
结果在158例先证者中，发现COL1A1/2基因致病突变125种，包含COL1A1突变74种(91例)，COL1A2突变51种(67例)，阳性检出率79%(158/200)；发现新突变63种，包括33种COL1A1突变和30种COL1A2突变。在上述125种COL1A1/2基因突变中，13种突变分别在2例以上先证者中重复出现(其中6种突变重复出现4次以上)，合计检出46次，检出率为29.11%(46/158)；完成产前基因诊断74例，其中包括患儿40例，正常胎儿34例。
结论建立基于Sanger DNA测序、靶向高通量测序和PCR-高分辨熔解曲线分析技术的OI基因诊断平台。在中国人群中，构建了OI相关COL1A1/2基因致病突变谱，并在此基础上完成大样本OI患者和高危胎儿的基因诊断。