【摘 要】
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目的探讨加味丹参饮(JWDSD)通过调节血清H2S和心肌Beclin1、LC3A/B、p62、ATG5对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用。方法 SPF级SD大鼠70只,随机分为7组,每组10只,分别为正常对照组、假手术组、MIRI模型组(模型组)、缺血预适应组、Na HS组、JWDSD组、JWDSD+CSE抑制剂(JWDSD+PPG)组,各组大鼠均口服给药14 d。最后一次给药两小时后,模
【基金项目】
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funding support from the National Natural Science Foundation of China (No. 81704065); Hunan Provincial Natural Science Foundation (No. 2019JJ40225); the Scientifi
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目的探讨加味丹参饮(JWDSD)通过调节血清H2S和心肌Beclin1、LC3A/B、p62、ATG5对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用。方法 SPF级SD大鼠70只,随机分为7组,每组10只,分别为正常对照组、假手术组、MIRI模型组(模型组)、缺血预适应组、Na HS组、JWDSD组、JWDSD+CSE抑制剂(JWDSD+PPG)组,各组大鼠均口服给药14 d。最后一次给药两小时后,模型组、外源性H2S、JWDSD、和JWDSD+PPG组大鼠结扎冠状动脉左前降支30分钟,随后剪开结扎线再灌注90分钟建立模型,假手术组大鼠术后仅暴露胸腔,不进行冠状动脉结扎。采集血液样本,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测H2S水平。采集心脏组织,进行组织病理学和免疫组化检测,实时荧光定量聚合酶链式反应分析Beclin1、自噬蛋白5 (ATG5) m RNA表达,Western blot分析Beclin1、轻链3A/B (LC3A/B)、p62蛋白表达。结果 (1)模型组大鼠血清H2S含量明显降低(P <0.01), JWDSD可明显提高模型组大鼠血清H2S含量(P<0.01), CSE抑制剂(PPG)明显降低JWDSD组大鼠H2S水平(P<0.01)。(2)与正常对照组比较,MIRI模型组发生心肌组织坏死和细胞破坏,JWDSD可缓解模型大鼠心肌组织坏死,但PPG可逆转JWDSD的改善作用。(3)模型组心脏组织Beclin1、LC3A/B、p62表达水平明显升高(P <0.001),但可被JWDSD降低(P <0.05, P <0.01, P <0.001), JWDSD对Beclin1、LC3A/B、p62表达的抑制作用可被PPG部分逆转(P <0.05, P <0.01)。(4)模型组大鼠自噬相关基因Beclin1、ATG5表达水平明显升高(P <0.001),JWDSD可明显下调Beclin1和ATG5的表达(P <0.05, P <0.001),而JWDSD的抑制作用可被PPG部分逆转(P <0.001)。结论我们的实验结果显示,JWDSD可以通过增加内源性H2S的生成,下调Beclin1、LC3A/B、p62和ATG5的表达来抑制自噬信号通路,从而发挥抗MIRI作用。
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