【摘 要】
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目的 研究17β-雌二醇对解聚素金属蛋白酶9(ADAM9)表达水平的影响. 方法 应用盐析法提取人类基因组DNA,扩增ADAM9基因启动子目的片断,构建表达ADA M9启动子的报告基因质粒.应
【机 构】
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山东大学附属省立医院神经内科,山东大学附属千佛山医院泌尿外科
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目的 研究17β-雌二醇对解聚素金属蛋白酶9(ADAM9)表达水平的影响. 方法 应用盐析法提取人类基因组DNA,扩增ADAM9基因启动子目的片断,构建表达ADA M9启动子的报告基因质粒.应用脂质体转染法,分别转染入人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH、人胚肾细胞HEK293和宫颈癌细胞HeLa内.17β-雌二醇处理各组细胞后,检测ADAM9启动子转录效率.结果 成功扩增了ADAM9启动子区1676 bp目的片段,构建了ADAM9启动子报告基因质粒pGL-ADAM9,瞬时转染入细胞内.17β-雌二醇处理SK-N-SH细胞后,ADAM9启动子转录活性上升至31.250±1.328,较处理前的15.471±1.256增加约2倍,差异有统计学意义(P＜0.05).HEK293细胞内,ADAM9启动子转录活性上升至13.499±0.866,较处理前的8.513±1.356增加约1.6倍,差异有统计学意义(P＜0.05).HeLa细胞中没有观察到17β-雌二醇对ADAM9启动子转录活性的影响. 结论 17β-雌二醇能上调人ADAM9启动子的表达水平,是ADAM9基因表达的激活剂.
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