乳糖诱导大肠杆菌产褐藻胶裂解酶的条件优化

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本文研究了使用乳糖替代IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)诱导褐藻胶裂解酶在重组大肠杆菌中表达的可行性,通过摇瓶实验,分别对诱导终浓度、诱导温度、诱导时机、诱导时间等方面进行了单因素实验并利用响应面对条件进行了优化设计,并使用Ni—NTA亲和柱对粗酶液进行了纯化得到纯酶。结果表明,诱导乳糖终浓度22mmol/L,诱导温度29℃,诱导22h,酶活可达到8.552U/mL。说明乳糖可以作为基因工程菌的高效诱导剂。
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