探讨载脂蛋白A5（ApoA5）对人脂肪间充质干细胞（AMSC）成脂分化的影响及其机制。
方法脂肪组织来源于2015年2至7月在中南大学湘雅二医院进行腹部外科手术治疗的40例患者，以手术方法获取患者皮下脂肪组织，经胶原酶消化法得到人AMSC后诱导分化为成熟脂肪细胞，分别以600、1 200 ng/ml ApoA5蛋白干预细胞，即为ApoA5 600 ng/ml组、ApoA5 1 200 ng/ml组，并以不加ApoA5蛋白干预的细胞为对照组。于诱导分化后第7、14天收获细胞，进行以下检测：通过甘油三酯（TG）检测试剂盒检测ApoA5对TG含量的影响；通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测ApoA5对脂肪酸结合蛋白（aP2）、脂肪酸合酶（FAS）等成脂分化标志物mRNA表达的影响；通过RT-qPCR和Western blot法检测ApoA5对诱导细胞死亡的DFF45样效应因子C（CIDEC）mRNA和蛋白表达的影响；通过RT-qPCR和Western blot法检测ApoA5对CCAAT/增强子结合蛋白β（C/EBPβ）mRNA和蛋白表达的影响。利用慢病毒转染技术，在AMSC中过表达CIDEC，分为慢病毒阴性对照组、慢病毒过表达CIDEC组及慢病毒过表达CIDEC+ApoA5组（ApoA5干预浓度为1 200 ng/ml），检测在CIDEC过表达的情况下ApoA5对AMSC成脂分化过程中上述指标的影响。
结果（1）ApoA5对AMSC中TG含量的影响：干预后第7、14天，ApoA5 600和1 200 ng/ml组AMSC中TG含量均低于对照组（P均<0.05）。（2）ApoA5对AMSC中aP2和FAS mRNA表达水平的影响：干预后第7天，ApoA5 600和1 200 ng/ml组AMSC中aP2、FAS mRNA表达水平均明显低于对照组（P均<0.05）。干预后第14天，ApoA5 600和1 200 ng/ml组AMSC中aP2、FAS mRNA表达水平均进一步低于对照组（P均<0.05）。（3）ApoA5对AMSC中CIDEC mRNA和蛋白表达水平的影响：干预后第7天，ApoA5 600、1 200 ng/ml组AMSC中CIDEC mRNA及蛋白表达水平均明显低于对照组（P均<0.05）。干预后第14天，ApoA5 600和1 200 ng/ml组AMSC中CIDEC mRNA及蛋白表达水平均进一步低于对照组（P均<0.05）。（4）ApoA5对AMSC中C/EBPβ mRNA和蛋白表达水平的影响：干预后第7天，ApoA5 600、1 200 ng/ml组AMSC中C/EBPβ mRNA及蛋白表达水平均明显低于对照组（P均<0.05）。干预后第14天，ApoA5 600和1 200 ng/ml组AMSC中C/EBPβ mRNA及蛋白表达水平均进一步低于对照组（P均<0.05）。（5）CIDEC过表达后ApoA5对AMSC中TG含量的影响：干预后第7、14天，慢病毒过表达CIDEC组AMSC中TG含量均高于慢病毒阴性对照组（P均<0.05），而慢病毒过表达CIDEC组AMSC中TG含量与慢病毒过表达CIDEC+ApoA5组比较差异则均无统计学意义（P均>0.05）。（6）CIDEC过表达后ApoA5对AMSC中aP2和FAS mRNA表达水平的影响：干预后第7天，慢病毒过表达CIDEC组AMSC中aP2、FAS mRNA表达水平均高于慢病毒阴性对照组（P均<0.05）。干预后第14天，慢病毒过表达CIDEC组AMSC中aP2、FAS mRNA表达水平均进一步高于慢病毒阴性对照组（P均<0.05）。而干预后第7、14天，慢病毒过表达CIDEC组AMSC中aP2、FAS mRNA表达水平与慢病毒过表达CIDEC+ApoA5组比较差异均无统计学意义（P均>0.05）。（7）CIDEC过表达后ApoA5对AMSC中C/EBPβ mRNA和蛋白表达水平的影响：干预后第7天，慢病毒过表达CIDEC组AMSC中C/EBPβ mRNA和蛋白表达水平均高于慢病毒阴性对照组（P均<0.05）。干预后第14天，慢病毒过表达CIDEC组AMSC中C/EBPβ mRNA和蛋白表达水平均进一步高于慢病毒阴性对照组（P均<0.05）。而干预后第7、14天，慢病毒过表达CIDEC组AMSC中C/EBPβ mRNA和蛋白表达水平与慢病毒过表达CIDEC+ApoA5组比较差异均无统计学意义（P均>0.05）。
结论ApoA5可抑制AMSC成脂分化，而这一作用可能是通过下调成脂分化关键因子CIDEC的表达实现的。