【摘 要】
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目的:检查大鼠Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)肾小球系膜细胞(glomerularmesangial cell,GMC)的增生病变及亚溶解型(sublytic)C5b-9复合物在GMC增殖中的作用.方法:复制大
【机 构】
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南京医科大学微生物与免疫学系,江苏南京,210029
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目的:检查大鼠Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)肾小球系膜细胞(glomerularmesangial cell,GMC)的增生病变及亚溶解型(sublytic)C5b-9复合物在GMC增殖中的作用.方法:复制大鼠Thy-1N模型,分别于注射Thy-1抗体后18 h、3 d和7d时,取肾组织,用real-time PCR和Western blot方法检查其肾组织中细胞增殖指标,即细胞周期蛋白D2(cyclin D2)和增殖细胞核抗原(proliferative cell nuclear antigen,PCNA)的mRNA丰度及蛋白表达水平.用免疫荧光观察肾小球中C5b-9复合物的沉积.同时,使用BrdU掺入法、光镜及电镜观察大鼠肾小球细胞的增殖情况.此外,体外培养大鼠GMC,进行不同分组处理后再给予sublytic C5b-9刺激,用3H-胸腺嘧啶核苷酸掺入法(3H-thymidine incorporation,3H-TdR)检查GMC的增殖情况.结果:大鼠Thy-lN病变18 h,肾组织中cyclin D2、PCNA表达和肾内BrdU阳性细胞数均开始升高,实验3d和7d,其表达进一步提高.同时肾小球内可见C5b-9复合物沉积,部分C5b-9包绕的肾细胞形态完好.另形态学观察还发现,实验18 h,部分GMC溶解坏死,而实验3 d,GMC数量明显增多,7d增加更为显著.体外实验中,大鼠GMC在sublytic C5b-9刺激后18h,其细胞增殖水平显著增高,而用sublytic C5b-9刺激GMC产生的培养上清处理正常的GMC后,亦能轻度刺激GMC增殖.结论:大鼠Thy-1N肾小球病变存在早期增殖和继发增生的病理改变,而GMC的早期增殖可能与sublytic C5b-9作用有关.
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