【摘 要】
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本研究旨在应用表面等离子共振技术(surface plasmon resonance,SPR)建立鸭瘟血清的SPR检测方法.PCR扩增鸭瘟gC基因全长,亚克隆于原核表达载体pET32a中,诱导、表达、纯化鸭瘟
【机 构】
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郑州海关技术中心,河南郑州450003;许昌海关,河南许昌461000;郑州市动物卫生监督所,河南郑州450000
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本研究旨在应用表面等离子共振技术(surface plasmon resonance,SPR)建立鸭瘟血清的SPR检测方法.PCR扩增鸭瘟gC基因全长,亚克隆于原核表达载体pET32a中,诱导、表达、纯化鸭瘟gC蛋白,将其作为捕获蛋白偶联芯片,建立了鸭瘟的SPR检测方法.敏感性、特异性和实用性分析结果显示,该SPR方法仅与鸭瘟阳性血清有明显反应,而对鸭流感病毒、番鸭细小病毒、传染性喉气管炎病毒、小鹅瘟病毒、马立克病毒、鸭源沙门菌和鸭源大肠杆菌等血清为阴性反应;倍比稀释鸭瘟阳性血清,SPR的灵敏度可达0.1 μg;对留存的19份疑似鸭瘟血清的SPR检测与商业化ELISA的检测结果完全一致.上述结果表明,本研究建立的表面等离子共振技术具有灵敏度高、特异性强、稳定性好、样品免标记等特点,适用于鸭瘟血清的快速检测.
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