【摘 要】
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目的 构建含有人微管蛋白辅助因子A(TBCA)的真核表达载体并观察其对肾癌细胞株786-0增殖的影响.方法 构建真核表达载体pcDNA3.0-Flag-TBCA和pCMV-TBCA-IRES-EGFP,并进行酶切、测序检验、脂质体转染细胞后利用Western blot法检测蛋白表达.以四唑氮化合物(MTS)法绘制细胞生长曲线.结果 成功构建了真核表达载体pcDNA3.0-Flag-TBCA和pCM
【机 构】
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目的 构建含有人微管蛋白辅助因子A(TBCA)的真核表达载体并观察其对肾癌细胞株786-0增殖的影响.方法 构建真核表达载体pcDNA3.0-Flag-TBCA和pCMV-TBCA-IRES-EGFP,并进行酶切、测序检验、脂质体转染细胞后利用Western blot法检测蛋白表达.以四唑氮化合物(MTS)法绘制细胞生长曲线.结果 成功构建了真核表达载体pcDNA3.0-Flag-TBCA和pCMV-TBCA-IRES-EGFP.转染后TBCA在细胞中表达明显升高(P＜0.05).但在转染后第3、4、5、6天,重组质粒组吸光度值分别为0.52±0.04、0.85 ±0.04、1.20±0.08、1.61 ±0.11;与对照组比较无统计学意义(P＞0.05).结论 TBCA的过表达载体构建成功,但在786-0细胞中过表达TBCA后对并不能对细胞增殖产生明显影响。
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