【摘 要】
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以木本植物中的模式树种杨树和杉木茎段为试验材料,分别用多聚甲醛、丙酮和卡诺固定液,研究了这两个树种的冰冻切片技术体系。结果表明,液氮冷冻法对幼嫩的组织(如组培苗)有
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以木本植物中的模式树种杨树和杉木茎段为试验材料,分别用多聚甲醛、丙酮和卡诺固定液,研究了这两个树种的冰冻切片技术体系。结果表明,液氮冷冻法对幼嫩的组织(如组培苗)有较好的保护作用。多聚甲醛固定液可以较好地保存细胞的形态结构,冰冻切片较完整。丙酮和卡诺固定液加10%蔗糖保护之后效果更好,切片完整且可以进一步用于核酸提取。卡诺氏固定液固定后,杉木和杨树组培苗的蔗糖保护剂适宜质量分数为10%,液氮冷冻时间为50~90 s。脱水步骤可以使冰冻切片更清晰完整。而田间植株木质化程度较高的茎段组织则需要甘油软化辅助处理,即可获得清晰的冰冻切片。
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