应用重组慢病毒构建3T3-L1脂肪细胞chemerin过表达模型并进一步探讨其对糖代谢的影响及可能机制。
方法构建鼠chemerin过表达重组慢病毒，并设对照慢病毒，感染3T3-L1细胞，实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）法检测转染后chemerin表达水平；应用胰岛素、3-异丁基1-甲基黄嘌呤、地塞米松诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞，油红O染色鉴定；诱导分化第8天加入慢病毒重组体，继续培养5 d，葡萄糖氧化酶法检测各组葡萄糖消耗；RT-PCR法检测各组胰岛素受体底物1(IRS1)、胰岛素受体底物2(IRS2)、蛋白激酶B1（Akt1）、叉头状转录因子O1(FoxO1)基因表达水平；Western-blotting检测chemerin、丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶（Akt）、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（pAkt）、FoxO1、磷酸化叉头状转录因子O1(pFoxO1）蛋白水平。两组数据比较应用t检验。
结果Chemerin过表达慢病毒感染3T3-L1细胞72 h后细胞中可见红色荧光，RT-PCR结果显示：过表达组与空载对照组相比chemerin基因表达明显增加（分别为3.04±0.19比1.01±0.11，t=15.65，P<0.05）；chemerin过表达组葡萄糖消耗减少[分别为（3.30±1.44）比（6.07±1.15）mmol/L，t=-0.35，P<0.05]；RT-PCR结果显示：IRS1、IRS2基因水平无明显变化（均P>0.05），Akt1基因表达下降（分别为0.76±0.08比1.07±0.15,t=-3.11，P<0.05），FoxO1基因表达上调（分别为1.53±0.30与1.03±0.21,t=2.34，P<0.05）。Western-blotting结果显示：Chemerin过表达后chemerin蛋白水平增加（相对表达量分别为1.08±0.06比0.72±0.03，t=-10.12；P<0.05）；Akt、pAkt蛋白水平均降低（分别为0.74±0.21比1.23±0.20，0.58±0.17比0.92±0.07；t=2.81、3.17，均P<0.05），FoxO1蛋白水平升高（分别为1.04±0.09比0.76±0.14，t=-2.91，P< 0.05）、pFoxO1蛋白水平降低（分别为0.61±0.13比0.89±0.10，t=2.93，P<0.05）。
结论Chemerin可能通过下调Akt1 mRNA使3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗减少。