姜黄素抑制脂多糖诱导视网膜色素上皮细胞炎症反应

来源 :重庆医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yahu911
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目的:探讨姜黄素(curcumin)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial cells,RPE)炎症反应的抑制作用。方法:体外培养人RPE细胞株ARPE-19,CCK-8测定不同浓度姜黄素(5、10、20、30、40μmol/L)或不同浓度姜黄素和脂多糖(5μg/mL)刺激后细胞的活性,以此确定姜黄素的最适作用浓度。实时荧光定量(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)和IL-6的mRNA表达变化,酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定IL-6和IL-8的蛋白表达水平。蛋白质免疫印迹(Western blot)检测IкB-α、pIкB-α蛋白表达变化。结果:CCK-8:不同浓度姜黄素对ARPE-19细胞活性无影响(P5μmol/L=0.998,P10μmol/L=1.000,P20μmol/L=0.124,P30μmol/L=0.092,P40μmol/L=0.078),预先作用不同浓度的姜黄素对细胞活性有保护作用,20μmol/L保护作用明显(P=0.041)。PCR:姜黄素+LPS组IL-8的mRNA相对表达量(4.965±3.863)比LPS组(106.331±37.314)明显降低(P=0.000),姜黄素+LPS组IL-6的mRNA相对表达量(0.992±0.374)比LPS组(2.175±0.560)明显降低(P=0.005)。ELISA:姜黄素+LPS组IL-8的蛋白表达量[(191.600±18.773)pg/mL]比LPS组[(589.025±38.880)pg/mL]明显降低(P=0.000),姜黄素+LPS组IL-6的蛋白表达量[(113.906±27.947)pg/mL]比LPS组[(243.380±38.001)pg/mL]明显降低(P=0.000)。Western blot与LPS组相比较,姜黄素+LPS组的p-IкB-α蛋白的表达水平降低(P=0.001)。结论:姜黄素通过抑制NF-кB活性抑制了脂多糖诱导视网膜色素上皮细胞的炎症反应,保护视网膜色素上皮细胞。
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