【摘 要】
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为构建表达禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)基因的重组禽痘病毒,将禽痘病毒启动子LP2EP2驱动的H7亚型AIV HA基因cDNA和大肠杆菌LacZ基因插入禽痘病毒疫苗株F-0 17的复制非必需区.
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001
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为构建表达禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)基因的重组禽痘病毒,将禽痘病毒启动子LP2EP2驱动的H7亚型AIV HA基因cDNA和大肠杆菌LacZ基因插入禽痘病毒疫苗株F-0 17的复制非必需区.经蓝斑筛选后,对重组病毒又进行了3次蚀斑克隆.以不同代次重组禽痘病毒核酸为模板,利用H7亚型AIV HA基因特异的引物进行聚合酶链式反应,均扩增出1条特异的1.7kb DNA条带.收集不同代次的重组禽痘病毒细胞培养物进行免疫斑点试验,均检测到HA蛋白,表明H7 AIV HA在重组禽痘病毒中获得了成功表达.该重组禽痘病毒的构建为A IV病毒活载体疫苗的研制奠定了基础.
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