截短的丙型肝炎病毒核心区基因的克隆和表达

来源 :国际生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liyanhao1986
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目的 克隆和表达截短的丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)核心区基因,为制备HCV核心区抗体准备抗原.方法 根据软件分析选取带有优势抗原表位的HCV核心区多肽,找出对应DNA序列,逆转录PCR扩增目的基因,并将其克隆到原核表达载体中进行诱导表达.表达的目的蛋白纯化后用间接ELISA法检测免疫活性.结果 获得了序列正确的HCV目的基因片段.表达的目的蛋白为可溶性蛋白,能被很好地纯化.使用该纯化蛋白检测各种样本,结果HCV阴性样本的平均吸光度(A)值为0.081,HCV阳性样本与阴性对照的A值之比均>2.1,乙型肝炎和梅毒阳性样本的A值都在0.101以下.结论 成功地克隆和表达了HCV核心区小片段基因,获得了具有良好抗原性的截短HCV核心区多肽。

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