【摘 要】
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为了获得高活性的桑叶黄酮类化合物,建立了基于大孔径吸附树脂的模拟移动床色谱分离工艺,并对制备的桑叶黄酮提取物的体外抗氧化、抑制酪氨酸酶等生物活性进行测定.根据大孔
【机 构】
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江苏科技大学生物技术学院,江苏镇江212018;中国农业科学院蚕业研究所,江苏镇江212018
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为了获得高活性的桑叶黄酮类化合物,建立了基于大孔径吸附树脂的模拟移动床色谱分离工艺,并对制备的桑叶黄酮提取物的体外抗氧化、抑制酪氨酸酶等生物活性进行测定.根据大孔径树脂的静态和动态的吸附与解吸特性,从5种树脂中选取NKA-9型作为分离填料,上样时的最佳流速为6BV/h、体积为4 BV,洗脱时的最佳流速为6BWh、体积为2.5 BV.在此基础上,构建了4区6柱的模拟移动床色谱分离桑叶黄酮,获得优化工艺条件为上样流速0.6 mL/min、洗脱流速1.2mL/min、转换周期200 s,在该条件下所得桑叶黄酮的最高质量浓度为1.96 mg/mL,产量为141.12 mg/(BV·h).生物活性测定结果显示,模拟移动床色谱分离桑叶黄酮的酪氨酸酶抑制率提高了3.3倍,其半抑制浓度(IC50)为0.14 mg/mL;自由基清除率提高了3.1倍,其IC50为0.095 mg/mL.模拟移动床色谱分离所得的桑叶黄酮纯度较高,抗氧化和酪氨酸酶抑制活性均得到明显提高.
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