【摘 要】
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目的 研制一种检测人精子透明质酸酶的改良底物膜法,以提高临床对男性不育的诊断水平.方法 根据精子顶体透明质酸酶能溶解卵丘基质透明质酸的生化特性,通过改良透明质酸钠-明
【机 构】
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贵阳医学院组胚教研室,贵阳医学院组胚科研处,贵阳医学院组胚电镜室
【基金项目】
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贵州省长专项育人资金;贵州省科技厅农社处攻关项目
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目的 研制一种检测人精子透明质酸酶的改良底物膜法,以提高临床对男性不育的诊断水平.方法 根据精子顶体透明质酸酶能溶解卵丘基质透明质酸的生化特性,通过改良透明质酸钠-明胶底物膜法,后进行孵育及染色来显示透明质酸酶的活性.本研究检测了70例人精子透明质酸酶活性,并结合临床精液常规检查结果选择和分组标本(生育组26例,不育A组13例,不育B组31例),对生育组与各不育组之间的平均酶活性进行统计学分析.结果 在普通光镜下即可观察到在阳性反应区以深紫蓝色底膜为背景的清晰明亮的消化晕环,晕环数量及直径的大小与透明质酸酶活性成正比.生育组透明质酸酶平均阳性率为70.84%,酶活性亮区平均直径为78.17 μm;不育A组酶平均阳性率为60.02%,酶活性亮区平均直径为76.92 μm;不育B组酶平均阳性率为29.11%,酶活性亮区平均直径为8.22 μm;经t检验,生育组酶活性两项指标均高于不育B组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 本研究检测方法简便、可靠,并可连续观察单个精子顶体透明质酸酶活性反应,很适合作为临床评价精子功能的有效指标,并提高对男性不育的诊断水平.
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