目的 探讨组织蛋白酶B(CatB)在急性光损伤人皮肤成纤维细胞(HDF)中的表达变化及意义.方法 体外培养原代HDF,选取第4～8代细胞进行实验.实验设长波紫外线(UVA)照射组和不照射的对照组.CCK8法分别检测5、10、15、20和25 J/cm2 UVA照射后HDF的增殖率.用10 J/cm2 UVA单次照射致HDF急性光损伤,Western印迹及实时定量逆转录(RT)-PCR分别检测急性光损伤组HDF及对照组HDF照射后24、48、72 h CatB蛋白及mRNA表达;另外分别用10、15、20、25 J/cm2 UVA照射HDF,Western印迹及实时定量RT-PCR分别检测急性光损伤组及对照组HDF照射后48 h CatB蛋白及基因表达.数据采用SPSS 13.0统计软件行方差分析,两组间比较采用最小显著差异法(LSD).结果 UVA照射导致HDF增殖率下降;当UVA剂量≤10 J/cm2时,细胞存活率均保持在85％以上,各照光组分别与对照组24、48、72 h时比较,均P＜0.05.Western印迹结果显示,急性光损伤组(10 J/cm2 UVA照射)CatB蛋白灰度值在照射后24 h(0.76±0.14)、48 h(1.34±0.38)、72 h(0.82±0.09)均较对照组(分别为0.35±0.01、0.45±0.12、0.61±0.06)升高(均P＜0.05).实时定量RT-PCR显示,在急性光损伤组CatB的mRNA表达在照射后24 h(0.149±0.009)、48 h(0.173±0.009)、72 h(0.185±0.158)也较对照组(分别为0.089±0.015、0.091±0.010、0.111±0.017)上调(均P＜0.05).10、15、20、25 J/cm2 UVA照射HDF后48 h,CatB的蛋白灰度值分别为0.99±0.07、1.49±0.14、1.89±0.08、2.07±0.06,均较对照组(0.60±0.05)升高(均P＜0.05),CatB的mRNA表达也较对照组升高.结论 UVA致急性光损伤的皮肤成纤维细胞中CatB蛋白及mRNA表达均上调。
组织蛋白酶B在急性光损伤皮肤成纤维细胞中的表达及意义
【摘 要】
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目的 探讨组织蛋白酶B(CatB)在急性光损伤人皮肤成纤维细胞(HDF)中的表达变化及意义.方法 体外培养原代HDF,选取第4～8代细胞进行实验.实验设长波紫外线(UVA)照射组和不照射的对照组.CCK8法分别检测5、10、15、20和25 J/cm2 UVA照射后HDF的增殖率.用10 J/cm2 UVA单次照射致HDF急性光损伤,Western印迹及实时定量逆转录(RT)-PCR分别检测急性光
【机 构】
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830054乌鲁木齐,新疆医科大学第一附属医院皮肤科,中山大学附属第三医院皮肤性病科,中山大学附属第三医院皮肤性病科,中山大学附属第三医院皮肤性病科,中山大学附属第三医院皮肤性病科
【出 处】
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中华皮肤科杂志
【发表日期】
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2014年47期
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