人类免疫缺陷病毒Ⅰ型包膜糖蛋白gp41的基因重组表达

来源 :中华实验和临床病毒学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xyf669842466
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目的基因重组表达(HIV1gp41)抗原,并研制一种快速、简便、灵敏性高、特异性强的国产HIV1免疫检测试剂。方法选用HIV1型BH10毒株的包膜糖蛋白gp41的部分基因(69777497),重组在PBV221表达载体上。表达产物通过15%SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳初步分离纯化,根据RF值,切下含特异蛋白的胶带,以Westernblot法转移在硝酸纤维素膜上;免疫血清法检测合格者制备的抗原检测条带,经国家标准参比血清检测。结果获得1株含HIV1gp41基因的重组质粒,其蛋白的特异性表达为8%,经HIV1阳性血清检测和国家标准参比血清检定,该表达蛋白灵敏性、特异性均为100%。结论(1)可以选用单一的gp41作为HIV1感染初筛试剂的抗原。(2)表达载体PBV221其表达的目的蛋白为非融合蛋白,作为试剂中的抗原,可降低检测中的非特异性。(3)该试剂是一种简便、特异、灵敏性高的试剂。
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