H9和H10亚型禽流感病毒三重RT-PCR检测方法的建立

来源 :江西农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：justinhn

【摘要】

：

根据GenBank中H9和H10亚型禽流感病毒(AIV)的HA基因及所有亚型AIV M基因的保守序列,分别设计3对特异性引物,并优化退火温度和引物浓度及其配比等条件,建立了可同时鉴别检测H9

【作者】

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李丹谢芝勋李孟罗思思谢丽基张民秀黄娇玲范晴王盛谢志勤邓显文曾婷婷张艳芳

【机构】

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广西壮族自治区兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室,广西南宁,530001;

【出处】

：

江西农业学报

【发表日期】

：

2020年4期

【关键词】

：

禽流感病毒 H9亚型 H10亚型 M基因三重RT-PCR 检测

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根据GenBank中H9和H10亚型禽流感病毒(AIV)的HA基因及所有亚型AIV M基因的保守序列,分别设计3对特异性引物,并优化退火温度和引物浓度及其配比等条件,建立了可同时鉴别检测H9和H10亚型AIV的三重RT-PCR检测方法.特异性实验结果表明,该方法可以特异性地扩增出H9、H10亚型AIV及M基因对应大小的目的条带,而对其余亚型AIV仅M基因出现特异性条带,其它禽病病原体均未扩增出任何特异性条带.敏感性实验结果表明,该方法对H9、H10亚型HA基因及M基因质粒的扩增下限均为5×104拷贝/μL.此外,该方法对临床样品的检测结果与病毒分离及测序结果完全一致.

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