【摘 要】
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目的 探讨黄芩清热除痹胶囊(HQC)含药血清对强直性脊柱炎(AS)患者外周血单核细胞(PBMCs)氧化应激的影响.方法 将40只大鼠按随机数字表法分为HQC低、中、高剂量组,空白组、阴性组(生理盐水),其中HQC低、中、高3组大鼠连续给药7天处死取血清;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HQC含药血清对PBMCs增殖的影响;将PBMCs分为正常组、模型组、HQC组、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂(Compound C)组、HQC含药血清+Compound C组;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测超
【机 构】
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安徽中医药大学第一附属医院风湿科 合肥230031;安徽中医药大学第一附属医院数据中心 合肥230031
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目的 探讨黄芩清热除痹胶囊(HQC)含药血清对强直性脊柱炎(AS)患者外周血单核细胞(PBMCs)氧化应激的影响.方法 将40只大鼠按随机数字表法分为HQC低、中、高剂量组,空白组、阴性组(生理盐水),其中HQC低、中、高3组大鼠连续给药7天处死取血清;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HQC含药血清对PBMCs增殖的影响;将PBMCs分为正常组、模型组、HQC组、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂(Compound C)组、HQC含药血清+Compound C组;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醇(MDA)、脂质过氧化产物(LPO)、总抗氧化能力(TAOC)的表达;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白免疫印迹(Western Blot)检测AMPK/叉头转录因子O3a(FOXO3a)/锰超氧化物歧化酶(MnSOD)信号通路相关基因及蛋白的表达.结果 中剂量HQC含药血清具有显著抑制PBMCs增殖的作用,确定其最佳作用时间为24 h.与正常组比较,模型组MDA、LPO明显升高,SOD、TAOC明显降低(P＜0.01);与模型组比较,HQC、HQC+Compound C组MDA、LPO明显降低,SOD、TAOC明显升高(P＜0.01),Compound C组MDA、LPO明显升高,SOD、TAOC明显降低(P＜0.01);与Compound C组比较,HQC+Compound C组MDA、LPO明显降低,SOD、TAOC明显升高(P＜0.01);与正常组比较,模型组AMPK、FOXO3a、MnSOD mRNA及AMPK、p-AMPK、FOXO3a、p-FOXO3a、MnSOD蛋白表达水平明显降低(P＜0.01);与模型组比较,HQC组AMPK、FOXO3a、MnSOD mRNA及AMPK、p-AMPK、FOXO3a、p-FOXO3a、MnSOD蛋白表达水平明显升高(P＜0.01),Compound C组AMPK、FOXO3a、MnSOD mRNA及AMPK、p-AMPK、FOXO3a、p-FOXO3a、MnSOD蛋白表达水平明显降低(P＜0.05,P＜0.01);与Compound C组比较,HQC+Compound C组AMPK、FOXO3a、MnSOD mRNA及AMPK、p-AMPK、FOXO3a、p-FOXO3a、MnSOD蛋白表达水平明显升高(P＜0.01).结论 HQC含药血清能通过活化AMPK、FOXO3a、MnSOD信号通路,改善AS患者PBMCs氧化应激.
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