人白细胞介素24蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活检测

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构建人白细胞介素24蛋白酵母双杂交诱饵载体,并检测其自激活作用。采用PCR技术特异性扩增人白细胞介素24基因IL-24,将其克隆入酵母双杂交诱饵质粒pGBKT7中,通过PCR扩增、限制性酶切鉴定及序列测定,获得质粒pGBKT7-IL-24。采用PEG/L iAc法将其转入酵母AH109中,经表型筛选检测其自激活作用,同时利用对照质粒组筛选组氨酸(H is)本底表达抑制剂3-AT的合适工作浓度。结果获得了无自激活作用的诱饵载体pGBKT7-IL-24。确定了组氨酸(H is)本底表达抑制剂3-AT的最佳工作
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