shRNA表达载体对HSV-2ICP4基因的干扰效应

来源 :遵义医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yelulsww910

【摘要】

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目的构建针对Ⅱ型单纯疱疹病毒（HSV-2）ICP4基因的短发夹RNA（shRNA）重组表达载体，探究该载体表达的shRNA对HSV-2的抑制作用。方法重组表达载体通过脂质体转染法转染HEK293细胞，并接

【作者】

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袁俊杰吕延成

【机构】

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遵义医学院珠海校区

【出处】

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遵义医学院学报

【发表日期】

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2013年1期

【关键词】

：

RNA干扰短发夹RNA 质粒载体 Ⅱ型单纯疱疹病毒 ICP4基因 RNA interference small hairpin RNA （shRNA） pl

【基金项目】

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[基金项目]贵州省优秀科技教育人才首长专项资金项目（NO：2009122）.

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目的构建针对Ⅱ型单纯疱疹病毒（HSV-2）ICP4基因的短发夹RNA（shRNA）重组表达载体，探究该载体表达的shRNA对HSV-2的抑制作用。方法重组表达载体通过脂质体转染法转染HEK293细胞，并接种HSV-2，48h后，实时荧光定量RT-PCR检测mRNA转录情况，Westernblot检测ICP4蛋白的表达情况，终点滴定法测定病毒的滴度。结果与对照组相比，干扰组对mRNA抑制率为71％，使蛋白表达减少71．81％，并且病毒滴度也明显降低（P〈0．05）。结论构建的pGPU6／Neo-shRNA

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