【摘 要】
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为构建和表达犬血管内皮细胞生长因子(VEGF)奠定基础,从犬心脏组织提取总RNA和蛋白质,利用逆转录-聚合酶链反应方法,克隆VEGF基因,将其重组入测序载体测序;采用Western免疫印
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院心外科,德国Hannover医科大学心内科
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为构建和表达犬血管内皮细胞生长因子(VEGF)奠定基础,从犬心脏组织提取总RNA和蛋白质,利用逆转录-聚合酶链反应方法,克隆VEGF基因,将其重组入测序载体测序;采用Western免疫印迹方法检测VEGF蛋白质.结果发现:犬心脏VEGF cDNA存在3种异构体,其序列长635 bp、563 bp和431bp,编码188、164和120个氨基酸.犬VEGF与人VEGF相比,缺少第8位氨基酸-甘氨酸,同源性高达94%.在犬心脏Western免疫印迹方法检测到两种VEGF蛋白质的表达,分子量分别约为46 ku和30 ku.提示:VEGF164是犬心脏组织中主要的血管新生、血管张力和血管通透性调控因子.
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