多重半巢式聚合酶链反应检测巨细胞病毒DNA多聚酶基因

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目的: 探讨多重半巢式聚合酶链反应(msnPCR)在研究巨细胞病毒(CMV)DNA多聚酶基因(UL-54)中的应用价值.方法:从8例心肺移植患者血标本中提取DNA,以CMV-UL54为模板,自行设计6条特异性引物,建立msnPCR扩增系统.扩增产物在DNA测序仪上自动测序.结果:msnPCR能扩增出427 bp和1 052 bp两条目的片段,扩增产物测序表明存在导致氨基酸改变的碱基有义突变.结论:msnPCR扩增结合测序,可检测CMV-UL54的7个功能区目片段中的碱基突变,msnPCR比普通PCR更加省时和经济.
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