【摘 要】
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目的 提取金冠豆角籽粒中α-淀粉酶抑制剂（α-amylaseinhibitor,α-AI）并将其进行纯化,研究其抑制类型及抑制效果。方法 以金冠豆角籽粒为原料,通过Na Cl盐溶、（NH4）2SO4沉淀提取α-AI,使用G50、G75葡聚糖凝胶柱进行层析,用Na Cl洗脱液进行梯度洗脱,收集蛋白峰后,检测α-AI对猪胰淀粉酶的抑制活性;用Lineweaver-Burk双倒数绘图法和Michaeli
【基金项目】
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黑龙江省自然科学基金项目（LH2021C075）～～；
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目的 提取金冠豆角籽粒中α-淀粉酶抑制剂（α-amylaseinhibitor,α-AI）并将其进行纯化,研究其抑制类型及抑制效果。方法 以金冠豆角籽粒为原料,通过Na Cl盐溶、（NH4）2SO4沉淀提取α-AI,使用G50、G75葡聚糖凝胶柱进行层析,用Na Cl洗脱液进行梯度洗脱,收集蛋白峰后,检测α-AI对猪胰淀粉酶的抑制活性;用Lineweaver-Burk双倒数绘图法和Michaelis-Menton方程分析酶反应动力学,探究α-AI的抑制类型。结果 金冠豆角籽粒中提取的α-AI蛋白含量为1.72mg/mL,对猪胰淀粉酶抑制率为84.20%,半抑制浓度(semi-inhibition concentration, IC50)为（6.77±0.63） mg/mL。不添加抑制剂组和添加抑制剂组的α-淀粉酶的酶解曲线几乎相交于原点,并且酶最大反应速率(Vmax)随着抑制剂浓度的增大而减小,米氏常数（Km）几乎不变。结论 α-AI与猪胰淀粉酶的结合呈现可逆型非竞争性抑制。
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