【摘 要】
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研究探索表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是否调节PPARα以及PPARα活化对EGCG的肿瘤抑制作用影响及其机制.首先利用CCK-8试剂盒检测细胞存活率,之后分别采用western blottin
【机 构】
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苏州大学医学部放射医学与防护学院,江苏放射医学与防护重点实验室,苏州大学附属常州肿瘤医院放疗科
【基金项目】
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常州市科技支撑-社会发展项目;《科技导报》博士生创新研究资助计划;国家自然科学基金
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研究探索表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是否调节PPARα以及PPARα活化对EGCG的肿瘤抑制作用影响及其机制.首先利用CCK-8试剂盒检测细胞存活率,之后分别采用western blotting和reαl-time PCR检测蛋白质和mRNA表达水平;采用PPARα的特异性激动剂和特异性拮抗剂来改变PPARα的表达;应用荧光素酶报告基因系统及染色质免疫共沉淀研究PPARα对HO-1的调控.结果表明,随着EGCG浓度的增加,PANC1和A2780细胞的存活率逐渐下降.当EGCG处理肿瘤细胞后,PPARα蛋白水平会随着EGCG剂量的提高而增加.PPARα的特异性激动剂—氯贝特(clofibrate)能增加胰腺癌PANC1和卵巢癌A2780细胞对EGCG的敏感性,其机制是氯贝特能够抑制细胞保护性血红素加氧酶-1(HO-1)的诱导.荧光素酶报告基因实验和染色质免疫共沉淀实验(ChIP)表明,活化的PPARα能结合到HO-1启动子上的PPAR结合元件(PPRE)上并抑制HO-1的表达.研究表明,PPARα的活化能在转录水平对HO-1进行负调控,同时增加肿瘤细胞对EGCG的敏感性.
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