【摘 要】
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目的:探讨虫草素对氯化镉所致肾小管上皮细胞NRK-52E转分化及肾间质纤维化中的影响.方法:(1)体外培养NRK-52E细胞;(2)不同浓度氯化镉(5、10、50、100μmol/L)作用于NRK-52E细胞72 h;(3)不同浓度虫草素(5、20、80μg/ml)+10μmol/L氯化镉溶液共同作用于NRK-52E细胞72 h.通过CCK8检测细胞活力,Western blot方法检测NRK-52E细胞纤维化相关因子TGF-β1和CTGF、α-SMA以及肾小管上皮细胞表面主要标记蛋白E-cadherin
【机 构】
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同济大学附属杨浦医院肾脏内科 上海 200025
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目的:探讨虫草素对氯化镉所致肾小管上皮细胞NRK-52E转分化及肾间质纤维化中的影响.方法:(1)体外培养NRK-52E细胞;(2)不同浓度氯化镉(5、10、50、100μmol/L)作用于NRK-52E细胞72 h;(3)不同浓度虫草素(5、20、80μg/ml)+10μmol/L氯化镉溶液共同作用于NRK-52E细胞72 h.通过CCK8检测细胞活力,Western blot方法检测NRK-52E细胞纤维化相关因子TGF-β1和CTGF、α-SMA以及肾小管上皮细胞表面主要标记蛋白E-cadherin、细胞信号转导因子Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达情况.结果:与对照组相比,持续的镉作用会影响大鼠肾小管上皮细胞的生长状态,且浓度越高,细胞活性下降明显,差异具有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,氯化镉组中NRK-52E细胞纤维化相关因子TGF-β1和CTGF、α-SMA表达增加,E-cadherin表达下降,细胞信号转导因子Smad2/3、p-Smad2/3表达均升高.随着虫草素加入的量的升高,TGF-β1和CTGF、α-SMA表达逐渐下降,E-cadherin表达升高,细胞信号转导因子p-Smad2/3、Smad2/3表达均逐渐下降,虫草素与TGF-β1键合良好.结论:本实验证实镉对肾小管上皮细胞生长状态的抑制作用,可能通过TGF-β1/Smad信号通路启动并调节肾小管上皮细胞转分化.而虫草素能够抑制这一过程,从而抑制肾小管间质纤维化.
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