研究一种芳姜黄酮衍生物(ATD)对人皮肤黑色素瘤A375细胞增殖及凋亡的影响。
方法不同浓度(5、10、20、40、80 μmol/L)ATD、长春新碱及芳姜黄酮体外作用A375及人皮肤成纤维细胞(HSF) 48 h。CCK-8法检测细胞增殖抑制率；吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色，倒置显微镜观察细胞凋亡形态；DNA片段化检测细胞凋亡；比色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)活性；流式细胞仪检测细胞凋亡及周期。
结果ATD、长春新碱及芳姜黄酮对A375细胞有抑制增殖作用，且呈剂量依赖性(ATD ：R2= 0.99 ，F= 340.96；长春新碱：R2= 0.99，F= 349.19；芳姜黄酮：R2= 0.89，F= 25.41，均P < 0.05)，三者IC50分别为(15.96±0.02)、(77.00±0.04)及(356.95±0.01)μmol/L。当药物浓度为5 μmol/L及10 μmol/L时，ATD对HSF增殖抑制率分别为(8±0.06)％和(25±0.02)%，长春新碱为(33±0.04)％和(29±0.08)%，芳姜黄酮为(49±0.09)％和(34±0.07)%；ATD对A375细胞抑制率分别为(26±0.06)％和(39±0.02)%，长春新碱为(8±0.04)％和(17±0.08)%，芳姜黄 ®为(6±0.09)％和(10±0.07)%，与二甲基亚砜相比，差异均有统计学意义(P<0.05)，且ATD对A375细胞增殖抑制活性强于长春新碱及芳姜黄酮(P<0.05)，但对HSF细胞毒性却明显低于长春新碱及芳姜黄酮(P<0.05)。ATD、长春新碱及芳姜黄酮均可诱导A375细胞凋亡，caspase-3活性随3种药物浓度增加而增强，且药效为ATD >长春新碱>芳姜黄酮。流式细胞仪检测证实，3种药物都能诱导细胞发生不同程度凋亡，同芳姜黄酮及长春新碱相比，ATD能显著诱导细胞凋亡，且以晚期凋亡为主。随药物浓度增加，ATD组G1期A375细胞逐渐增多，G2期及S期细胞数明显减少。
结论ATD对A375细胞有抑制增殖及促凋亡作用，该作用明显强于芳姜黄酮及长春新碱，其机制可能是激活caspase-3，使细胞周期阻滞在G1期，进而抑制肿瘤细胞分化与增殖。