人PPARγ-LBD cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达纯化

来源 :生命科学研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zhuhande

【摘要】

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从正常中国人的面部脂肪组织分离总RNA，采用RT-PCR获得人的PPARγ-LBD cDNA，然后克隆至原核表达载体pET28a，构建高效原核表达质粒pET28a-PPARγ-LBD，序列分析表明正常中国人的PPA

【作者】

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曹廷兵叶治家巩燕彭家和江渝

【机构】

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第三军医大学大坪医院高血压内分泌科,第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室

【出处】

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生命科学研究

【发表日期】

：

2004年1期

【关键词】

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人 PPARγ-LBDcDNA 克隆大肠杆菌表达 RT-PCR 过氧化物酶体增生物激活受体 PPARγPPARγ-LBD cloning express

【基金项目】

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国家自然科学基金(30070358),,重庆市科技攻关项目(200126)

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从正常中国人的面部脂肪组织分离总RNA，采用RT-PCR获得人的PPARγ-LBD cDNA，然后克隆至原核表达载体pET28a，构建高效原核表达质粒pET28a-PPARγ-LBD，序列分析表明正常中国人的PPARγ-LBD cDNA序列与Gene Bank报道的序列一致,把构建的pET28a-PPARγ-LBD质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，IPTG进行诱导表达，Western blot检测表达产物，在相对分子质量34kDa处有特异的蛋白表达条带，表达蛋白以可溶性和包涵体方式存在、在N末端融合6&

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