建立了一种灵敏、特异、精确定量分析花椒叶多糖的苯酚-硫酸法,采用该方法测定了陕西大红袍花椒叶中多糖的含量。该方法选择半乳糖作为标准单糖,484 nm为工作波长。通过单因素实验和正交试验优化得到了较佳显色反应条件是加样次序为苯酚-样品-浓硫酸,显色温度为25℃,质量分数为5%的苯酚添加量为0.3 m L,浓硫酸添加量为3.5 m L,显色时间为30 min。系统适应性实验显示该方法的标准曲线方程为y=0.012 7x-0.007 6(R2=0.997),线性范围为10.00~60.00μg/m L,LOD和LOQ分别为2.08μg/m L和6.30μg/m L,日内、日间精密度分别在0.49%~3.64%,5.17%~6.05%之间,平均回收率为101.19%。样品溶液在显色反应后的2 h内稳定性较好。测定发现陕西大红袍花椒叶中w(多糖)在8.11~8.89 mg/g之间。该方法为花椒叶多糖的定量分析和花椒叶资源的开发利用提供了参考。