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目的探讨不同的冷冻保护剂浓度、渗透平衡时间对小鼠卵母细胞冷冻后存活率及存活卵母细胞ICSI受精后胚胎发育潜能的影响。方法小鼠卵母细胞来自用HMG/HCG刺激的性成熟小鼠,依据预平衡液浓度,即1.0M或1.5M丙二醇(PROH),将卵母细胞分为A、B组,依据装载液蔗糖浓度(0.1、0.2、0.3M)的不同将A、B两组分为A1、A2、A3、B1、B2、B36组;依卵母细胞在平衡液中的渗透平衡时间不同(<10min、>20min)分为C、D两组;依装载液中的渗透平衡时间不同(<10min、>30min)分为E、F两组。卵母细胞在预平衡液中渗透平衡10~20min,在装载液中渗透平衡5~30min后进入慢速程序化冷冻并保存,快速解冻后观察卵母细胞存活率I、CSI受精率和优质胚胎形成率。结果A、B组间冻存卵母细胞存活率差异有非常显著性统计学意义(43.7%vs 23.5%);A2组的卵母细胞存活率最高(52.5%),A3组次之(42.9%);C、D两组间冻存卵母细胞存活率、透明带破裂率差异无统计学意义。E、F两组间存活率、透明带破损率差异有统计学意义(52.5%vs6.3%;6.6%vs 75.0%);新鲜组和冷冻组卵母细胞受精率、卵裂率、优质胚胎率差异均有统计学意义(81.8%vs 40%;77.3%vs 100%;90.9%vs 83.3%)。结论(1)在慢速冷冻中,平衡液较低的PROH浓度(1.0M)和装载液较高的蔗糖浓度(0.2M)有益于卵母细胞冻存存活率的提高。(2)小鼠卵在平衡液中的渗透平衡时间以10min为宜;在装载液中室温下的渗透平衡时间以5~10min为宜,最好不要超过15min。(3)冻存复苏后的存活卵经ICSI受精后受精率下降,但受精后胚胎的发育潜能似乎未受多大影响。