猪2型圆环病毒ORF2基因在塞姆利基森林病毒RNA复制子衍生的新型真核表达载体中的表达

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猪2型圆环病毒(porcine circovirus 2,PCV2)是断乳仔猪多系统衰竭综合征(postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS)的原发性病原.PCV2的ORF2编码病毒唯一的结构蛋白Cap.根据GenBank中公布的PCV2 JXL株的序列设计一对引物,应用PCR方法从该毒株感染的PK-15细胞中扩增出完整的ORF2基因,将此基因克隆于本实验室此前构建的塞姆利基森林病毒(Semliki Forest virus,SFV)RNA复制子衍生的新型真核表达载体pSFV1CS中的BamHⅠ位点,获得重组质粒pSFV1CS-Cap.用pSFV1CS-Cap分别转染BHK-21细胞和293T细胞,经间接免疫荧光试验检测表明,PCV2 ORF2基因在转染细胞中得到表达.小鼠接种试验表明,该重组质粒能诱导小鼠产生特异性抗体.
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