大鼠心肌缺血再灌注时心肌细胞核1,3,4,5-四磷酸肌醇受体的结合特性改变

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目的 观察大鼠心肌缺血再灌注时心肌细胞核1,3,4,5-四磷酸肌醇受体(IP4R)的结合特性改变,进一步探索心肌缺血再灌注损伤时细胞凋亡的病理机制.方法 TUNEL技术检测心肌细胞核凋亡率.蔗糖密度梯度离心法提纯心肌细胞核,放射配体分析法检测心肌细胞核膜上IP4R的结合特性变化.结果心肌缺血再灌注组大鼠心肌细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.01).大鼠心肌细胞核膜上存在两个与IP4配体结合容量不同、亲和力不同的单位点结合受体.心肌缺血再灌注组心肌细胞核膜上IP4R两结合位点解离常数值较对照组分别降低63%及55%(P<0.05),且高亲和位点IP4R受体密度(Bmax)显著高于对照组(P<0.05),而低亲和位点IP4R的Bmax无显著改变.两组心肌细胞核经蛋白激酶C磷酸化后,IP4R的结合特性显著增高(P<0.05),以心肌缺血再灌注组效应更明显.对照组大鼠心肌细胞核IP4R的结合特性对核外钙离子是浓度依赖性的,心肌缺血再灌注组大鼠在钙超载情况下,结合力也显著性增强.结论大鼠心肌缺血再灌注病理情况下心肌细胞核IP4R结合特性显著增强,致核内钙浓度增高,这可能是心肌缺血再灌注损伤中心肌细胞凋亡的主要病理机制之一。

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