【摘 要】
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目的研究淫羊藿苷(Icariin,ICA)促进体外培养大鼠骨髓基质细胞(Bone marrow stromal cells,BMSCs)的成骨性分化机理。方法贴壁分离法培养大鼠骨髓基质细胞并用流式检测细胞纯
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目的研究淫羊藿苷(Icariin,ICA)促进体外培养大鼠骨髓基质细胞(Bone marrow stromal cells,BMSCs)的成骨性分化机理。方法贴壁分离法培养大鼠骨髓基质细胞并用流式检测细胞纯度。骨髓基质细胞传代至第2代时分别用含有成骨性诱导剂的1×10-5mol/L ICA和LY294002处理24 h后用Real-time RT-PCR检测ALP、eNOS和iNOS的mRNA表达水平,Western blotting检测ALP、p-AKT、eNOS和iNOS的蛋白表达量。结果原代骨髓基质细胞体外培养传代至第2代时纯度可达95%以上。基因和蛋白质检测均显示ICA可极显著的促进碱性磷酸酶(ALP)的表达(P<0.01),PI3K的特异性抑制剂LY294002会抑制ICA对ALP的提高,ICA+LY294002组与CON组的表达差别不明显。p-AKT的蛋白表达变化与ALP相似。ICA可以提高eNOS表达(P<0.01),加抑制剂能使其降低(P<0.01),而iNOS的ICA组与ICA+LY294002组无明显差别。结论 ICA促进BMSCs成骨性分化过程涉及到PI3K/AKT通路,且AKT位于eNOS的上游;eNOS和iNOS共同作用,但iNOS起主要作用。
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