【摘 要】
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目的:探讨丹酚酸B（Salvianolic acid B,SAB）改善高磷诱导的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells, VSMCs）钙化的作用及机制。方法:采用大鼠血管平滑肌细胞（A7r5）钙化体外模型，用细胞增殖与活性检测试剂盒（cell counting kit-8,CCK-8）检测SAB对细胞活力的影响；2.6μmol·g-1高磷诱导VSMCs钙化，加入丹
【机 构】
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上海中医药大学中医肾病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室(上海中医药大学)
【基金项目】
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上海市青年科技英才杨帆计划（编号：19YF1449800）； 国家自然科学基金面上项目（编号：81873617）； 上海中医临床重点实验室（编号：20DZ2272200）资助；
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目的:探讨丹酚酸B（Salvianolic acid B,SAB）改善高磷诱导的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells, VSMCs）钙化的作用及机制。方法:采用大鼠血管平滑肌细胞（A7r5）钙化体外模型，用细胞增殖与活性检测试剂盒（cell counting kit-8,CCK-8）检测SAB对细胞活力的影响；2.6μmol·g-1高磷诱导VSMCs钙化，加入丹参多酚酸类化合物丹酚酸B、丹酚酸C（Salvianolic acid C,SAC）、迷迭香酸（Rosmarinic acid, RA）及细胞自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine, 3-MA,5 nmol·g-1),采用邻甲酚酞络合铜法及茜素红S染色检测细胞钙化程度；Western blot检测VSMCs钙化指标Runx2、OPN,自噬相关蛋白Beclin-1和LC3II/LC3I以及平滑肌收缩表型蛋白Calponin、SM22α的表达。结果:（1）钙离子浓度定量实验及茜素红染色实验显示SAB显著减轻高磷诱导的VSMCs钙化；（2）SAB浓度小于100 nmol·g-1以下时对VSMCs生存活力无明显影响，选择3,10,30 nmol·g-1剂量进行后续实验；Western blot显示SAB明显降低VSMCs成骨样分化的分子标志物Runx2、OPN蛋白表达（P＜0.05）,上调自噬标志物Beclin-1、LC3-I/II及VSMCs收缩表型标志物Calponin、SM22蛋白表达（P＜0.05）。（3）SAB减轻高磷诱导VSMCs钙化的作用被自噬抑制剂3-MA阻断。结论:SAB可通过激活自噬抑制VSMCs钙化及向成骨样表型转化。
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