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背景:血管紧张素原基因是第一个被发现的原发性高血压候选基因,T174M5和M235T多态均位于AGT基因第二外显子,且存在连锁不平衡。启动子区域A-6G和G-217A位点多态对其基因表达起重要调节作用,且血管紧张素原基因的表达产物与血压水平的维持密切相关。目的:探讨血管紧张素原基因A-6G,T174M和G-217A位点多态性与中国汉族人群原发性高血压发病风险的关系。设计:整群抽样,病例-对照分析。单位:南京医科大学第一附属医院老年医学科与心血管科,国家人类基因组南方研究中心,江苏省东台市人民医院心血管科。对象:实验于2005-09/10在江苏省东台市农村完成。①263例实验对象均来自江苏省盐城市东台县农村,其中原发性高血压组177例为未经药物治疗的原发性高血压患者,高血压的诊断参照1999年WHO/ISH高血压诊断标准(收缩压≥140mmHg和/或舒张压≥90mmHg);正常对照组86例。②纳入标准:实验对象为汉族;长期居住本地非外来人口;能清楚回答问题;经病史、临床症状、体征及辅助检查确诊;统一问卷面访调查资料完整。③排除标准:原发性高血压组排除继发性高血压,正常对照组排除高血压家族史,同时两组人群均排除肝、肾慢性疾病和糖尿病。方法:采集外周静脉血3mL,用FlexiGeneDNAKit(250)提取人外周血中DNA。应用primer3软件进行引物设计,并排除引物序列中的多态位点。多重聚合酶链反应扩增后,取3μL反应产物用琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果,扩增成功的聚合酶链反应产物用QIAquickPCRPurifica-tionKit纯化,纯化后的产物用DNaseⅠ片段化,片段化的酶切产物以脱氧核苷酸末端转移酶进行荧光素标记。每个单核苷酸多态各设计2条等位基因特异性探针和1条错配探针,芯片用OmniGridTM100点样仪制备,每个探针重复3次,形成3个阵列。杂交液95℃变性10min后,立即置于冰上冷切,取10μL杂交液加入到芯片矩阵上,50℃杂交2h,然后洗涤,甩干。GenePix4000B共聚焦激光扫描仪进行芯片扫描,利用GenePixPro提取得到每条探针的荧光信号强度值,通过计算每个单核苷酸多态的等位基因分数判断基因型。主要观察指标:①两组血管紧张素原基因各多态位点基因型分布频率的比较。②血管紧张素原基因A-6G和T174M位点多态性与原发性高血压发病风险的相关分析。③两组血管紧张素原基因A-6G,T174M和G-217A位点多态性对血压的影响。结果:按意向处理分析,263例实验对象均进入结果分析。①血管紧张素原基因A-6G位点AA,AG,GG基因型(P=0.014)以及A,G等位基因频率(P=0.004,OR=0.44)差异明显;T174M位点CC,CT,TT基因型(P=0.031)以及C,T等位基因频率(P=0.014,OR=0.55)差异有显著性意义;未发现G-217A位点GG,AG,AA基因型(P=0.722)以及G,A等位基因频率(P=0.403,OR=0.80)有明显差异。②携带A-6G多态AA基因型和T174M多态CC基因型的个体发生原发性高血压的风险分别减少57%(95%可信区间=0.23～0.82,P=0.010)和56%(95%可信区间=0.25～0.79,P=0.006)。③两组血管紧张素原基因A-6G,T174M和G-217A位点各基因型的收缩压、舒张压和平均动脉压的差异均无显著性意义(F=0.100～2.911,P均>0.05)。结论:血管紧张素原基因A-6G位点AA基因型和T174M位点CC基因型可能会减少中国汉族人群原发性高血压发病风险,未发现G-217A多态基因型与其有显著相关性。